Restriktaj enzimoj




Malkovrataj ekde 1973, restriktaj enzimoj kapablas rekoni specife mallongan sinsekvon de 4 ĝis 10 bazparoj kaj distranĉi DNA-n ĉe la rikonita loko. Ili ebligas erigi DNA en reduktitajn fragmentojn aŭ trafe distranĉi DNA ĉe specifa loko.La distranĉebla loko ĉe DNA estas palindronaj sinsekvoj, tio signifas ke inversigante nukleotidoj-sinsekvon, oni havigas la saman nukleotid-ordon. Ekz: ATGTA inverse estas ATGTA ankau.Ju pli longas la sinsekvo, des pli ĝi estas mallofta. Estas facile kompreni ke ATA estas pli ofte renkontebla kombinaĵo ol ATGCGTA.




Enhavo






  • 1 Netfina tranĉo


  • 2 Kunteniĝa tranĉo


  • 3 Uzado


  • 4 Ekzemploj


  • 5 Eksteraj ligiloj





Netfina tranĉo |





Netfina tranĉo: Restrikta enzimo distranĉas nete la dufadenan DNA-n.


Iuj enzimoj distranĉas DNA-lokon meze de ĝi kaj produktas du fragmentojn kies ekstremaĵoj estas netaj. Temas tiam pri netfina tranĉo.



Kunteniĝa tranĉo |





Kunteniĝa tranĉo: Restrikta enzimo distranĉas malnete la dufadenan DNA-n.


Plej parto de la enzimoj tamen distranĉas malsimetrie: oni parolas tiukaze pri kunteniĝa tranĉo (aŭ malnetfina tranĉo). Ĉiu fragmento havas fadenon pli longan ol la alian. Pluraj centoj el tiuj enzimoj estis karakterizitaj: ili rekonas grandan variecon de tiaj distranĉoj.



Uzado |


Restriktaj enzimoj estas uzataj por:

establi tranĉaran mapon de ĉiuj DNA-molekuloj kiujn oni
deziras karakterizi. Tio konsistas el determino de la resktriktejoj-ordo laŭlonge de la konsiderata molekulo, kiuj produktos, post ties « enzima digestado », divers-longajn fragmentojn kies longeco povos esti difinita per elektroforezo.

manipuli DNA ĝenerale. Oni ekzemple povas tranĉi plasmidon antaŭ fremd-DNA-enplasmidigo...











Ekzemploj |


Enzimo	      Organismo-fonto	                Rekonita sinsekvo       Tranĉejo

EcoRI        Escherichia coli	                5'GAATTC              5'---G     AATTC---3'
3'CTTAAG 3'---CTTAA G---5'

BamHI        Bacillus amyloliquefaciens        5'GGATCC              5'---G     GATCC---3'
3'CCTAGG 3'---CCTAG G---5'

HindIII      Haemophilus influenzae            5'AAGCTT              5'---A     AGCTT---3'
3'TTCGAA 3'---TTCGA A---5'

MstII        Microcoleus species               5'CCTNAGG
3'GGANTCC

TaqI         Thermus aquaticus                 5'TCGA                5'---T   CGA---3'
3'AGCT 3'---AGC T---5'

NotI         Nocardia otitidis                 5'GCGGCCGC
3'CGCCGGCG

HinfI        Haemophilus influenzae            5'GANTC
3'CTNAG

AluI         Arthrobacter luteus               5'AGCT                5'---AG  CT---3'	
3'TCGA 3'---TC GA---5'


Eksteraj ligiloj |



  • http://nist.rcsb.org/pdb/molecules/pdb8_1.html

  • http://rebase.neb.com

  • http://tools.neb.com/NEBcutter2/index.php

  • http://rebase.neb.com/rebase



Restriction enzyme.jpg



Sma1.jpg








Popular posts from this blog

What other Star Trek series did the main TNG cast show up in?

Berlina muro

Berlina aerponto